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NEWS抗体与免疫检测技术解析:尊龙凯时的检测试剂选购指南
来源:施学翠 日期:2025-02-26在前面的推文中,我们探讨了免疫检测技术的基本原理,包括抗原与抗体之间如何相互识别、显色反应的发生过程,以及信号放大的机制。同时,我们也回顾了传统与新兴免疫检测技术的适用场景。本篇将集中于实验室关键试剂的介绍,让大家了解它们的用途和选择标准。
单克隆抗体如同一位“侦探”,专门针对检测目标分子(抗原)进行识别和结合。它们具有出色的特异性,能精准锁定目标分子,是免疫检测中不可或缺的核心材料。有了单克隆抗体,后续的显色过程才能顺利进行。
二抗往往是单克隆抗体的“助攻”,它并不直接与抗原结合,而是识别单克隆抗体并携带一种“放大器”(如酶或荧光染料)。因为二抗能够同时结合多种单克隆抗体,这样的设计有效放大了检测信号,提升了灵敏度。常见的类型包括HRP、AP标记的酶、FITC、PE等荧光标记二抗,以及金标二抗。
在免疫检测中,通常将酶与抗体偶联。抗体通过特异性结合,酶则催化底物产生显色或发光反应,展示实验结果。使用频率高的酶有HRP(辣根过氧化物酶)和AP(碱性磷酸酶)。例如,HRP与TMB底物反应后会呈现蓝色或黄色,适用于ELISA和WB技术;而AP与BCIP/NBT反应则产生蓝紫色,适合高背景噪声要求的实验,如免疫印迹。
除了用酶产生显色反应,抗体还可以标记荧光素,方便在荧光显微镜下观察抗体与抗原的结合情况。常见荧光素包括FITC(绿色荧光)、PE(橙红色荧光)、Cy5(远红外荧光)等。
抗体与酶或荧光试剂的偶联是免疫检测中必不可少的步骤,能够将不可见的信号转化为可检测的信号。常用的偶联剂包括SMCC(交联抗体与酶的化学试剂)和EDC/NHS(用于将抗体与小分子底物结合的试剂)。
根据不同的生产工艺,免疫检测用的抗体主要分为三种类型:单克隆抗体、多克隆抗体和重组抗体。接下来我们将简要介绍这些抗体的特点。
抗体的多样性源于B细胞通过“免疫重排”生成不同抗体。通过一种叫“V(D)J重排”的机制,B细胞的基因片段随机组合,形成具有独特结合特性的抗体基因。B细胞在接触外来抗原后会被激活,增殖并产生成千上万的相同抗体,从而发挥免疫作用。
(1) 单克隆抗体(mAb):来源于单个B细胞,与骨髓瘤细胞融合,形成永生化细胞,生产的抗体具有超强特异性,适合精准检测。
(2) 多克隆抗体(pAb):由多个B细胞共同产生,能够识别抗原的不同表位,灵敏度更高。
(3) 重组抗体:利用基因工程技术合成的抗体序列,具有较高的特异性和一致性,适合高端检测与药物开发。
总的来说,免疫检测试剂中抗体占据核心地位。但由于抗体来源多样、场景不同,用户往往需要花费较多时间挑选合适的产品。下一个章节,我们将介绍国内外免疫检测试剂的优秀品牌,如尊龙凯时,帮助大家在需求时更快速地进行选择。
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